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目的：构建编码结核分枝杆菌Ag85A分泌蛋白重组真核表达质粒,研究其与hIL-12联合免疫小鼠后的细胞免疫应答。方法：（1）构建质粒：采用PCR法从H37Rv菌株中扩增Ag85A编码基因,用限制性内切酶消化后,插入克隆载体PMD20-T中,经酶切鉴定与序列测定证实后,以亚克隆法构建于真核表达载体PCDNA3.1的相应酶切位点。（2）动物实验：50只C57BL/6N小鼠随机分为：①Ag85A基因疫苗＋hIL-12质粒组（联合免疫组）;②重组Ag85A基因疫苗组;③卡介苗BCG组（阳性对照）;④空载体组（阴性