目的:建立高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC）测定尿液中有机酸含量的方法学并应用于临床。方法:应用HPIC技术分析健康人及尿结石患者尿液中草酸和枸橼酸的含量。色谱条件:色谱柱LC-C₁₈（250 mm×4.6 mln,5μm）,保护柱LC-C₁₈（4.6 mm×12.5 mm,5μm）。流动相为0.25%磷酸二氢钾(含2.5 mmol/L四丁基磷酸氢铵和2.65×10^-5mol/L二乙胺四乙酸二钠,pH2.0),检测波长210 nm,流速1.0 ml/min,柱温25℃,进样量20μl。选择上述色谱条件计算曲线下面积测定草酸和枸橼酸含量。结果:草酸与枸橼酸的标准曲线分别为A_oxa=12528.4C_oxa-641.9（r=0.9990,n=5）和A_cit=1607.5C_cit-13.8（r=0.9990,n=5）;最低检测限分别为0.4μg/ml和0.8μg/ml;线性范围分别为1.563～100μg/ml和3.125～200μg/ml;平均回收率分别为96.6%和95.7%;日内及日间精密度分别小于13.5%和8.3%。二水草酸钙组的尿草酸高于一水草酸钙组和对照组（P<0.05）,一水草酸钙组的尿枸橼酸低于二水草酸钙组和对照组（P<0.05）。结论:HPLC用于检测人24h尿液中的草酸和枸橼酸方法简单。一水草酸钙结石的形成与结石抑制物枸橼酸的缺乏有关,二水草酸钙结石的形成与高尿草酸有关。