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研究了高效液相色谱法测定酶法制备L-色氨酸的最佳参数。结果表明,流动相分配比V（磷酸二氢钾溶液）∶V（甲醇）=30∶70,流量1 mL/min,C18柱分离,柱温38℃,检测波长265 nm时为高效液相色谱法检测L-色氨酸的最佳参数。回收率在92.00%-110.00%,外加丝氨酸没有干扰发酵液中L-色氨酸含量测定。此方法用于样品中的L-色氨酸的测定,分离效果良好。