【摘 要】
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为研制一种预防犬科动物狂犬病的新型疫苗,将含有狂犬病毒ERA株糖蛋白基因(Rabies glycoprotein, Rgp)表达盒的穿梭质粒pVAXΔE3Rgp中的Rgp表达盒克隆入犬2型腺病毒(Canine a
【机 构】
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军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062
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为研制一种预防犬科动物狂犬病的新型疫苗,将含有狂犬病毒ERA株糖蛋白基因(Rabies glycoprotein, Rgp)表达盒的穿梭质粒pVAXΔE3Rgp中的Rgp表达盒克隆入犬2型腺病毒(Canine adenovirus type 2, CAV2)骨架质粒pPoly2-CAV2中,获得重组质粒pPoly2-CAV2-ΔE3-Rgp,释放其基因组,转染MDCK细胞系,获得E3缺失区(Deletion of earlyprotein 3, ΔE3)含有Rgp表达盒的重组病毒CAV2-ΔE3-Rgp.该重组病毒能在MDCK细胞上产生典型的腺病毒细胞病变.通过酶切、PCR、基因测序,表明该重组病毒含有完整的Rgp表达盒.通过RT-PCR、Western blot等检测,表明该重组病毒能够表达Rgp抗原.用该重组病毒免疫犬,3次免疫后,可以诱导犬产生特异的抗CAV2 HI抗体,其效价超过1∶256和抗狂犬病病毒(Rabies virus, RV)中和抗体,其效价超过0.50IU/mL.试验结果表明,获得的重组病毒免疫犬后,能够产生抗狂犬病毒和腺病毒的高效价保护性抗体,是一种有潜力的犬科动物狂犬病毒腺病毒二联疫苗候选株.
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