论文部分内容阅读
目的：构建3个针对凋亡蛋白抑制因子livin基因mRNA的小干扰RNA（siRNA）表达载体，然后转染HCT-8／V细胞。为研究livin基因沉默对HCT-8/V细胞耐长春新碱特性的影响奠定基础。方法：合成3对靶基因livin的siRNA寡核苷酸序列通过退火生成转录模板，与线性pGCsi—H1／Neo／GFP质粒连接．转化DH5α钙化菌抽提重组质粒，测序鉴定。用脂质体2000将重组质粒转染HGT-8／V细胞并用G418筛选。结果：转化大肠杆菌涂布平板长出阳性菌落，测序结果与所设计、合成的livin的siR