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【中图分类号】R2 【文献标识码】B 【文章编号】1008-1879(2012)09-0177-01
作者以自拟中药方进行动物实验,探讨中药对自发性高血压大鼠血压的影响,现报道结果如下。
1 实验材料
1.1 实验药物。平肾通络降压颗粒:由深圳市三九现代中药有限公司提供的中药免煎颗粒剂组成,批号0408011,为淡棕黄色干粉。本品临床用量为日最大剂量15g,(相当于生药约176g,以人体75kg计,约为2.35g生药/kg/d)。卡托普利混悬液:卡托普利片(规格:25mg/片,青岛黄海制药有限公司生产,批号:0405221)。
1.2 实验动物。自发性高血压大鼠(SHR)32只,雄性10周龄,体重223.5±23.5g,血压均大于150mmHg,购自北京维通利华科研实验动物中心(动物合格证N0.0055741)。正常雄性Wistar大鼠8只,体重225.1±21.9g,购于山东中医药大学实验动物中心(二级实验动物,合格证号:20050406)。
1.3 实验仪器及试剂。CRS-Ⅲ型大鼠电脑血压心率仪,MDF-330型-20℃低温冰箱,低温离心机(BHG HERMLE ZK364,德国),BECKMAN—700全自动生化分析仪,GC-911型r放射免疫计数器,Teflon匀浆器,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(Ald)试剂盒(北京原子高科核技术应用股份有限公司)。
2 实验方法
2.1 动物分组及用药。自发性高血压大鼠(SHR)32只,随机分为模型组M、平肾通络降压颗粒低剂量组L、平肾通络降压颗粒高剂量组H和卡托普利对照组C。正常Wistar大鼠8只,为空白对照组N。共40只大鼠开始实验观察。H组、L组以及C组每日同一时间分别按1ml/100g体重灌服平肾通络降压颗粒和卡托普利药水溶剂(相当于平肾通络降压颗粒13.5g/kg·d-1和27g/kg·d-1,用药量约为临床预计用量的10倍和20倍,卡托普利67.4mg/kg·d-1,为临床用量的10倍。)。N组和M组每日同一时间灌服1ml/100g体重蒸馏水,以上各组均自由饮水和普食饲养。
2.2 实验方法。血压测量;用大鼠电脑血压心率仪间接测定大鼠尾动脉收缩压,每日上午测大鼠血压。首次给药后,第2、4、6、24小时测血压1次。静脉取血:连续给药8周,末次给药后24小时禁食12小时后,以乌拉坦1mg/kg腹腔注射麻醉动物,自下腔静脉取血2ml,注入防凝试管中。4℃3000rpm离心10min,分离血清。采用液相竞争法,取聚苯乙烯试管编号。血浆AngⅡ的含量及血浆醛固酮含量的测定:采用均相竞争放射免疫分析法直接测定血浆AngⅡ及血浆醛固酮(ALD)的含量,严格按照试剂盒说明书操作。待反应结束后,4℃3500rpm离心15分钟,吸弃上清液,由r放射免疫计数器测定各样品沉淀的cpm数,并由r计数器预先编制的程序,直接给出有关参数、标准曲线和样品浓度。
2.3 统计学处理。使用CS10.31简明统计软件包处理。计量数据采用均值±标准差的形式。组间和组内比较采用t检验。
3 结果
3.1 对SHR血压的影响。
3.2 对SHR血浆中血管紧张素和醛固酮的影响(见表2)。
4 讨论
中医学理论认为高血压病早期肾损害的病机为肾气虚衰,肾中阴阳失调,肾络瘀血。根据肾虚为本,血瘀为标的病机特点,确立补益肾气、调理阴阳、活血通络的治疗原则。药理研究表明方中桑寄生、黄芪、黄精、泽泻、酸枣仁、怀牛膝等均有不同程度的降压作用。酸枣仁有镇静作用。丹参、水蛭还具有改善微循环、抗血小板的聚集和血栓形成,使血液粘度下降,对缺血性损害的保护作用。动物实验发现:平肾通络降压颗粒可降低SHR的血压,其降压作用和缓、持久。作用是通过多个环节、多个靶点而综合实现的,是治疗高血压病早期肾损害的有效方剂。
作者以自拟中药方进行动物实验,探讨中药对自发性高血压大鼠血压的影响,现报道结果如下。
1 实验材料
1.1 实验药物。平肾通络降压颗粒:由深圳市三九现代中药有限公司提供的中药免煎颗粒剂组成,批号0408011,为淡棕黄色干粉。本品临床用量为日最大剂量15g,(相当于生药约176g,以人体75kg计,约为2.35g生药/kg/d)。卡托普利混悬液:卡托普利片(规格:25mg/片,青岛黄海制药有限公司生产,批号:0405221)。
1.2 实验动物。自发性高血压大鼠(SHR)32只,雄性10周龄,体重223.5±23.5g,血压均大于150mmHg,购自北京维通利华科研实验动物中心(动物合格证N0.0055741)。正常雄性Wistar大鼠8只,体重225.1±21.9g,购于山东中医药大学实验动物中心(二级实验动物,合格证号:20050406)。
1.3 实验仪器及试剂。CRS-Ⅲ型大鼠电脑血压心率仪,MDF-330型-20℃低温冰箱,低温离心机(BHG HERMLE ZK364,德国),BECKMAN—700全自动生化分析仪,GC-911型r放射免疫计数器,Teflon匀浆器,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(Ald)试剂盒(北京原子高科核技术应用股份有限公司)。
2 实验方法
2.1 动物分组及用药。自发性高血压大鼠(SHR)32只,随机分为模型组M、平肾通络降压颗粒低剂量组L、平肾通络降压颗粒高剂量组H和卡托普利对照组C。正常Wistar大鼠8只,为空白对照组N。共40只大鼠开始实验观察。H组、L组以及C组每日同一时间分别按1ml/100g体重灌服平肾通络降压颗粒和卡托普利药水溶剂(相当于平肾通络降压颗粒13.5g/kg·d-1和27g/kg·d-1,用药量约为临床预计用量的10倍和20倍,卡托普利67.4mg/kg·d-1,为临床用量的10倍。)。N组和M组每日同一时间灌服1ml/100g体重蒸馏水,以上各组均自由饮水和普食饲养。
2.2 实验方法。血压测量;用大鼠电脑血压心率仪间接测定大鼠尾动脉收缩压,每日上午测大鼠血压。首次给药后,第2、4、6、24小时测血压1次。静脉取血:连续给药8周,末次给药后24小时禁食12小时后,以乌拉坦1mg/kg腹腔注射麻醉动物,自下腔静脉取血2ml,注入防凝试管中。4℃3000rpm离心10min,分离血清。采用液相竞争法,取聚苯乙烯试管编号。血浆AngⅡ的含量及血浆醛固酮含量的测定:采用均相竞争放射免疫分析法直接测定血浆AngⅡ及血浆醛固酮(ALD)的含量,严格按照试剂盒说明书操作。待反应结束后,4℃3500rpm离心15分钟,吸弃上清液,由r放射免疫计数器测定各样品沉淀的cpm数,并由r计数器预先编制的程序,直接给出有关参数、标准曲线和样品浓度。
2.3 统计学处理。使用CS10.31简明统计软件包处理。计量数据采用均值±标准差的形式。组间和组内比较采用t检验。
3 结果
3.1 对SHR血压的影响。
3.2 对SHR血浆中血管紧张素和醛固酮的影响(见表2)。
4 讨论
中医学理论认为高血压病早期肾损害的病机为肾气虚衰,肾中阴阳失调,肾络瘀血。根据肾虚为本,血瘀为标的病机特点,确立补益肾气、调理阴阳、活血通络的治疗原则。药理研究表明方中桑寄生、黄芪、黄精、泽泻、酸枣仁、怀牛膝等均有不同程度的降压作用。酸枣仁有镇静作用。丹参、水蛭还具有改善微循环、抗血小板的聚集和血栓形成,使血液粘度下降,对缺血性损害的保护作用。动物实验发现:平肾通络降压颗粒可降低SHR的血压,其降压作用和缓、持久。作用是通过多个环节、多个靶点而综合实现的,是治疗高血压病早期肾损害的有效方剂。