基于序列宏基因组学技术的土壤II型聚酮合酶KSα基因的挖掘

来源 :南京农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:angelgsj
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[目的]本文旨在挖掘土壤环境宏基因组(environmental DNA,eDNA)中的II型聚酮化合物酮基合成酶基因(ketosynthase alpha, KSα),并依据获得的KSα基因与化合物结构的关系初步预测其所在基因簇可能合成的II型聚酮化合物种类。[方法]利用II型聚酮合酶基因KSα保守区域设计简并引物筛选珠穆朗玛峰及峨眉山土壤宏基因组文库,对筛选得到的KSα基因片段进行测序,并与已知II型聚酮化合物化合物KSα基因、孢子色素基因构建Neighbor-joining系统发生树,大肠杆菌的fabB基因作为系统发生树的外群。[结果]总共筛选得到28个珠峰文库来源的KSα基因,11个峨眉山文库来源的KSα基因。将这些KSα序列与34种编码已知II型聚酮化合物KSα基因和5种聚酮化合物孢子色素KSα基因的氨基酸序列构建系统发生树,显示eDNA来源的KSα基因许多与已知聚酮化合物的KSα基因相似性较低,并且除在不同II型聚酮结构类型对应的KSα基因分支中均有分布外,有些eDNA来源KSα基因在系统发生树中形成了独立的一个分支。[结论]利用宏基因组学方法可以获得新的聚酮生物合成基因,同时在同源分析的基础上对聚酮化合物的结构进行分析,预测合成新结构聚酮化合物的潜力,为更有效的挖掘新型聚酮化合物奠定基础。
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