【摘 要】
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目的:使用两种胞内pH敏感的荧光染料SNARF-4F/AM和BCECF/AM,利用激光扫描共聚焦显微镜进行胞内pH值(pHi)的测量。方法:SNARF-4F/AM和BCECF/AM均能被诱导胞内瞬时酸化和碱化,
【机 构】
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中山大学生命科学学院实验中心; 中山大学第一附属医院黄埔院区;
【基金项目】
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广东省科技计划资助项目(2007B031510008)
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目的:使用两种胞内pH敏感的荧光染料SNARF-4F/AM和BCECF/AM,利用激光扫描共聚焦显微镜进行胞内pH值(pHi)的测量。方法:SNARF-4F/AM和BCECF/AM均能被诱导胞内瞬时酸化和碱化,用单激发双发射比值测量法,比较SNARF-4F/AM和BCECF/AM的酸化和碱化与浓度线性关系。结果:SNARF-4F/AM孵育的细胞能够被诱导胞内酸化和碱化,并能较好地反应出浓度与pH值的线性关系,同时其诱导酸化后能够产生钠氢交换体(Na+/H+exchanger,NHE)介导的回复相;BCECF/AM孵育的细胞虽然能够产生一定程度的胞内酸化和碱化,但是其诱导酸化后不能产生NHE介导的回复相,说明利用SNARF-4F/AM能正确反应细胞内pH值的变化以及细胞膜上pH相关转运器的工作效率。结论:SNARF-4F/AM染料比BCECF/AM类染料更适合激光扫描共聚焦显微镜的使用。
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