【摘 要】
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目的 探讨冬凌草甲素(Oridonin)诱导肝癌细胞凋亡作用及其分子机制.方法 体外培养肝癌细胞株BEL-7402、SK-Hep1,采用不同浓度(0～ 10 μmol/L)的Oridonin处理细胞,WST-1方法检
【机 构】
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450003 郑州大学第一附属医院肝胆外科河南省消化器官移植重点实验室;450003,郑州大学第一附属医院感染科;450003,郑州大学第一附属医院肝胆外科;
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目的 探讨冬凌草甲素(Oridonin)诱导肝癌细胞凋亡作用及其分子机制.方法 体外培养肝癌细胞株BEL-7402、SK-Hep1,采用不同浓度(0～ 10 μmol/L)的Oridonin处理细胞,WST-1方法检测细胞的增殖率,锥虫蓝拒染法检测死细胞率,流式细胞学方法检测细胞的凋亡率,Western blot检测半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)蛋白,以及抗凋亡B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)家族蛋白bcl-2、bcl-xl、髓样细胞白血病-1(Mcl-1)表达.结果 WST-1检测结果显示,Oridonin作用于肝癌细胞株SK-Hep-1、BEL-7402细胞24h后的半数抑制剂量(IC50)分别是1.58、1.68 μmol/L;锥虫蓝拒染法检测显示,5μmol/L的Oridonin分别处理SK-Hep-1和BEL7402细胞48 h,2株肿瘤细胞的死亡率分别为96.54％和86.54％,相对于对照组差异均有统计学意义(P＜0.01).流式细胞仪检测显示,5 μmol/L的Oridonin分别处理SK-Hep-1和BEL7402细胞24h,2株细胞处理组细胞凋亡率分别为65％和44％;Western blot检测显示,Oridonin处理肝癌细胞24 h后,在两株肝癌细胞中均可检测到Caspase-3活化、PARP裂解,Mcl-1表达下调.结论 Oridonin对肝癌细胞有强效的诱导凋亡作用,其分子机制可能与下调Mcl-1后凋亡信号通路活化有关.
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