【摘 要】
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目的:构建具足够库容量的人牙胚cDNA 文库.方法:提取人牙胚mRNA并反转录成cDNA,经LD PCR扩增后, 将双链cDNA克隆到λ TripleX2中,包装噬菌体,以XL-1-Blue为受体菌滴定、扩增
【机 构】
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第四军医大学口腔医学院,中国科学院细胞生物学研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金，中国博士后科学基金
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目的:构建具足够库容量的人牙胚cDNA 文库.方法:提取人牙胚mRNA并反转录成cDNA,经LD PCR扩增后, 将双链cDNA克隆到λ TripleX2中,包装噬菌体,以XL-1-Blue为受体菌滴定、扩增文库,用两端引物做PCR鉴定.结果:500μl文库的库容量为0.8×106pfu,重组率为83%,10个克隆有9个可扩增出cDNA片段,长度为500～20 00bp. 结论:构建的文库具较好的库容量、重组率以及较大的插入片段.
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