海参溶菌酶基因克隆及在毕赤酵母中的表达与纯化

来源 :大连工业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sun949423350
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研究构建并筛选了具有抑菌活性的重组海参溶菌酶(Stichopus japonicus lysozyme,SJL)的毕赤酵母工程菌。从海参肠组织中提取总RNA,根据已经测得的SJL的基因序列(GenBank accession No.EF036468)设计引物,以总RNA为模板经RT—PCR获得目的基因,并将该基因与表达载体pPIC9K连接,构建重组质粒pPIC9K—SJL,再转化至毕赤酵母GS115中。利用MD、MM和含抗生素G418的YPD平板培养基筛选出表型为His^+Mut^5的高拷贝阳性菌株。挑选
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