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[目的]分离得到高纯度的小鼠睾丸支持细胞（Sertoli cell），用以研究它对精原干细胞（SSCs）生长的影响。[方法]取鼠龄3～7d的雄性ICR小鼠睾丸，采用胶原酶、透明质酸酶、胰蛋白酶和DNA酶消化分离Sertoli细胞及SSCs，经多次差异离心贴壁及低渗处理法进行纯化，用Sertoli细胞作饲养层观察SSCs的生长情况。[结果]Sertoli细胞纯度达90％，且以Sertoli细胞作饲养层培养SSCs，与对照相比，能明显促进sscs的增殖。[结论]四酶消化低渗处理法可获得高纯度的Sertoli细