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目的 建立不同生长年限虎杖的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，比较其化学成分的差异。方法 色谱柱为Diamonsil C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm），流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液（梯度洗脱），流速为1.0 mL/min，检测波长为286 nm，柱温为25℃，进样量为20μL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012A版软件建立25批（采收时间分别为移植后第1,2,3,4,5年，各5批）虎杖的HPLC指纹图谱，计算相似度；采用SIMCA-P 14.1软件建立偏最小二乘判别分析（PLS-DA）模型，分析其中化学成分的差异。结果 共标定19个共有峰，相似度为0.906～0.993。不同生长年限虎杖明显聚为5类，共筛选出6个差异标记物，按影响大小依次为峰15＞峰6（虎杖苷）＞峰8（白藜芦醇）＞峰17（大黄素）＞峰5＞峰1。结论 HPLC指纹图谱结合PLS-DA法能反映不同生长年限虎杖化学成分的差异，可为其采收和质量评价提供参考。