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目的 通过蛋白质片段互补检测(protein fragment complementation assay,PCA)技术检测重组人源性IL-8的生物学活性.方法 利用PCA方法构建了Split-TEV GPCR激活检测系统,为了验证其有效性,在不同的宿主系统中表达和纯化了各种亚型的人源性IL-8重组蛋白用于进行活性检测.蛋白样品包括:①IL-8亚型Ⅰ(残基21-99),通过在哺乳动物细胞HEK 293中分泌表达前体IL-8基因获得,其N端信号肽(残基1-20)被切除;②IL-8亚型Ⅱ(残基23-99)和亚型Ⅲ(残基28-99),通过在大肠杆菌BL21(DE3)中表达获得.结果 Split-TEV GPCR激活检测系统证明纯化后的重组人源性IL-8样品对天然受体IL8 RB都具有明显的激活活性,其EC50值分别为:12.32 ±0.89 ng/mL(亚型Ⅰ)、15.14±1.84 ng/mL(亚型Ⅱ)和2.85±0.50 ng/mL(亚型Ⅲ).结论 成功建立了一种新型的重组人IL-8活性检测方法,为进一步的理论研究和IL-8中和抗体的高通量筛选奠定了基础。