【摘 要】
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目的探讨JWA基因在氯化高铁血红素(hemin)和热应激单独或联合作用下的表达规律.方法用Western blot方法检测JWA蛋白表达;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测JWAmRNA表达变
【机 构】
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南京医科大学公共卫生学院分子毒理研究室
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目的探讨JWA基因在氯化高铁血红素(hemin)和热应激单独或联合作用下的表达规律.方法用Western blot方法检测JWA蛋白表达;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测JWAmRNA表达变化;用氯霉素乙酰转移酶-酶联免疫吸附试验(CAT-ELISA)方法检测hemin和热应激对JWA基因近端启动子转录活性的影响.结果50 μmoL/L hemin处理K 562细胞1周可使JWA蛋白表达增高(3.23±0.57)倍;而30 μmol/L hemin处理K 562细胞48 h可使JWA mRNA表达增加(1.37±0.06)倍.42℃处理K 562细胞2 h可使JWA蛋白表达增高(8.00±1.73)倍;42℃处理K 562细胞30min可使JWA mRNA表达明显升高(1.87±0.13)倍.hemin和热应激联合作用于K 562细胞后,JWA蛋白和mRNA的表达均低于单独处理.CAT-ELISA结果显示hemin及热应激单独处理可上调各自反应元件的应答,但二者联合作用后反应元件的应答似乎呈现一种部分拮抗的作用.结论hemin和热应激可能分别通过JWA近端启动子上各自的反应元件而调节JWA基因的表达.
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