【摘 要】
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目的 研究线粒体载体家族蛋白(MCFP)基因敲除对小鼠肝脏线粒体功能的影响.方法 利用CRISP/Cas9技术建立MCFP基因敲除小鼠模型,并检测小鼠体质量、脏器系数、血生化以及糖代谢
【机 构】
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军事科学院军事医学研究院生命组学研究所,北京102206;蛋白质组学国家重点实验室,北京蛋白质组研究中心,国家蛋白质科学中心(北京),北京 102206
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目的 研究线粒体载体家族蛋白(MCFP)基因敲除对小鼠肝脏线粒体功能的影响.方法 利用CRISP/Cas9技术建立MCFP基因敲除小鼠模型,并检测小鼠体质量、脏器系数、血生化以及糖代谢情况.分离小鼠原代肝实质细胞检测线粒体膜电位.提取肝脏线粒体,检测三磷酸腺苷(ATP)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平,利用非变性凝胶电泳偶联凝胶内酶活染色,检测线粒体呼吸链复合体活性.结果 与同窝对照小鼠相比,MCFP敲除小鼠生理指标无明显差异,但线粒体膜电位及ATP水平降低,呼吸链复合体活性下降、ROS升高、SOD活性下降、MDA含量增加.结论 MCFP基因敲除造成肝脏线粒体功能异常,提示MCFP在线粒体抗氧化损伤及合成ATP过程中发挥重要调控作用.
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