【摘 要】
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为研制同时防控基因VII型新城疫病毒（NDV）和H9N2亚型禽流感病毒（AIV）感染的新型高效多联疫苗，本研究将上游带有NDV HN基因非编码区（NCR）的H9N2亚型AIV流行株的血凝素基因（HA）插入到含有基因VII型NDV毒株F和HN基因的嵌合型NDV rLaSota-7F/HN全长基因组cDNA的质粒pNDFL-7F/HN中，构建含有H9N2亚型AIV流行株HA基因的重组NDV全长感染性克
【基金项目】
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国家重点研发计划（项目号：2016YFD0500800），题目：家禽重要疫病诊断与检测新技术研究；
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为研制同时防控基因VII型新城疫病毒（NDV）和H9N2亚型禽流感病毒（AIV）感染的新型高效多联疫苗，本研究将上游带有NDV HN基因非编码区（NCR）的H9N2亚型AIV流行株的血凝素基因（HA）插入到含有基因VII型NDV毒株F和HN基因的嵌合型NDV rLaSota-7F/HN全长基因组cDNA的质粒pNDFL-7F/HN中，构建含有H9N2亚型AIV流行株HA基因的重组NDV全长感染性克隆pNDFL-7F/HN-HA。将pNDFL-7F/HN-HA和辅助质粒共转染至BHK-21拯救出重组病毒rLaSota7-HA。对重组NDV进行了RT-PCR、Western Blot和IFA鉴定，以及生物学特性研究。结果表明，重组NDV rLaSota7-HA可以在鸡胚中稳定传代，且保留了LaSota株在鸡胚中高滴度复制、低致病性等生物学特性。rLaSota7-HA的鸡胚平均致死时间（MDT）为132 h,1日龄雏鸡脑内接种致病指数（ICPI）和6周龄鸡静脉接种致病指数（IVPI）均为0。鸡胚半数感染量(EID50)峰值达10-8.78/100μL，本研究构建的表达H9N2亚型AIV中国流行株HA基因的重组NDV rLaSota7-HA将为研制同时防控基因VII型NDV和H9N2亚型AIV感染的高效多联疫苗奠定基础。
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