东北林蛙体胶原蛋白酶法制备工艺

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目的探索胃蛋白酶法制备东北林蛙体胶原蛋白的最佳工艺条件,并对提取得到的胶原蛋白的纯度及其氨基酸含量进行测定。方法采用单因素及正交试验,以提取率为指标,优化胃蛋白酶提取东北林蛙蛙体胶原蛋白的工艺条件。通过紫外光谱(UV)分析确定东北林蛙体胃蛋白酶溶性胶原蛋白(PSC)的类型,反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定PSC中氨基酸的含量。结果 PSC最佳提取工艺为温度37℃,E/S 20%,料液比1∶20,时间12 h;在此条件下,胶原蛋白提取率达到88.6%。经紫外光谱(UV)分析,PSC在234 nm处有最强吸收峰,反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定发现,PSC氨基酸含量丰富,包含人体所需的8种必需氨基酸,其中甘氨酸(Gly)、脯氨酸(Pro)、亮氨酸(Leu)和丙氨酸(Ala)等氨基酸含量较高,符合Ⅰ型胶原蛋白特征。结论优化后的制备方法提取率高、重复性好,可为PSC的工业化生产提供参考。
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