【摘 要】
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目的 从基因启动子区DNA甲基化环节,探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3 polyunsaturated fatty acids,n-3PUFAs)对肥胖状态下瘦素表达的表观遗传调控机制.方法 3～4周龄C57BL/6J雄性小
【机 构】
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首都医科大学附属北京儿童医院北京市儿科研究所营养中心,北京,100045
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目的 从基因启动子区DNA甲基化环节,探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3 polyunsaturated fatty acids,n-3PUFAs)对肥胖状态下瘦素表达的表观遗传调控机制.方法 3～4周龄C57BL/6J雄性小鼠30只,随机被分为3组(每组10只),分别给予高脂饲料、鱼油n-3 PUFAs高脂饲料(脂肪含量均为34.9％,供能比为40％)以及正常脂饲料(脂肪含量为4.3％,供能比为10％)喂养4个月以诱导肥胖.喂养结束时取性腺周围脂肪组织,应用RT-PCR检测脂肪组织瘦素mRNA水平;应用亚硫酸盐修饰直接测序(bisulfite sequencing-PCR,BSP)法检测瘦素基因启动子区CpG甲基化程度;应用染色质免疫共沉淀-荧光定量PCR(CHIP RT-PCR)技术测定瘦素基因启动子区结合的DNA甲基化转移酶(DNMTs)、甲基化CpG结合蛋白2(MECP-2)以及RNA聚合酶2(Poly Ⅱ)的变化.结果 与正常脂饲料组小鼠相比,脂肪组织中瘦素mRNA表达在高脂饲料诱导肥胖小鼠明显增加,而在鱼油高脂饲料组肥胖小鼠无变化.基因启动子区甲基化结果显示,高脂肥胖小鼠瘦素基因启动子区CpG位点甲基化程度、DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和MECP 2含量均较正常饲料组显著升高,并伴随Poly Ⅱ含量减少;而鱼油高脂饲料组瘦素基因启动予区结合DNMT3a、DNMT3b and MeCP-2增加,但启动子区MECP-2含量与高脂饲料组比缺有显著降低,DNMT1和Poly Ⅱ以及CpG位点甲基化程度无改变.结论 肥胖状态下瘦素表达变化可能与基因启动子区DNA甲基化以及结合的相关调控蛋白、RNA聚合酶等有关;n-3 PUFAs对瘦素基因表达的调节也可能是通过对这些蛋白的影响而实现的.
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