施马伦贝格病毒核衣壳蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

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本研究旨在表达施马伦贝格病毒(Schmallenbergvirus,SBV)的核衣壳蛋白(N),进而制备其多克隆抗体。以SBV(BHS0株)的RNA为模板,RT-PCR扩增N基因序列,并将其克隆至原核表达载体pET-28a-c(+)中,获得pET-28a-SBV-N重组质粒。经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达His-SBV-N融合蛋白。在非变性条件下用Ni-NTA柱纯化His-SBV-N,并以此为抗原免疫新西兰大白兔制备多抗。经免疫亲和层析纯化后,利用Wes
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