【摘 要】
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目的改良现有的小胶质细胞纯化分离培养方法,建立稳定简便的培养模型。方法利用盐酸利多卡因注射液代替机械振摇纯化分离小胶质细胞;利用CD11b/c(OX42)免疫细胞化学的方法对
【机 构】
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华中科技大学同济医学院解剖学系,华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科
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目的改良现有的小胶质细胞纯化分离培养方法,建立稳定简便的培养模型。方法利用盐酸利多卡因注射液代替机械振摇纯化分离小胶质细胞;利用CD11b/c(OX42)免疫细胞化学的方法对分离的小胶质细胞纯度进行鉴定,同时观察小胶质细胞形态及活化指标NFкBp65的表达情况;利用流式细胞仪,结合细胞计数及MTT细胞活力测定检测纯化分离后小胶质的增殖情况。结果改良的方法可稳定的获得1.2×106个/培养瓶(75cm2,250ml)的小胶质细胞,纯度达到98%,存活率≥95%,形态上以阿米巴样为主,继续培养3-5d,约半数细胞可转变为静止状态。NFкBp65免疫细胞化学染色为胞浆表达。流式细胞仪检测结合细胞计数及MTT细胞活力检测结果显示,体外纯化培养的小胶质细胞多位于G0/G1期,培养过程中未出现明显的增殖。结论改良的方法易于操作,产量多,纯度高。为体外小胶质细胞进一步研究提供了基础。
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