【摘 要】
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目的获得能表达有生物学活性的成熟蛋白的人类神经胶质细胞源神经营养因子（glial cell line derived neurotrophic factor， GDNF）基因片段。方法分离神经胶质细胞瘤的mRNA，逆转录，采用PCR技术，获得GDNF基因片段，将其组装入高效表达载体pBV220中，表达、分离表达产物。测定其对鸡胚背根神经节的神经营养作用。结果PCR后获得402bp的GDNF编码成熟
【机 构】
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100054 北京市，首都医科大学北京神经科学研究所,中国康复研究中心,100054 北京市，首都医科大学北京神经科学研究所,100054 北京市，首都医科大学北京神经科学研究所
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目的获得能表达有生物学活性的成熟蛋白的人类神经胶质细胞源神经营养因子（glial cell line derived neurotrophic factor， GDNF）基因片段。
方法分离神经胶质细胞瘤的mRNA，逆转录，采用PCR技术，获得GDNF基因片段，将其组装入高效表达载体pBV220中，表达、分离表达产物。测定其对鸡胚背根神经节的神经营养作用。
结果PCR后获得402bp的GDNF编码成熟蛋白基因片段，测序结果表明：第424碱基由A变为G。将此片段组装入原核表达载体后，在菌体可溶性蛋白中获得有生物学活性的GDNF。1 000ml培养液可获4mg GDNF粗制品，50ng粗制品可促进鸡胚背根神经节生长。
结论获得了GDNF基因片段，并使其在原核表达系统中表达。在菌体可溶性蛋白组分中获得了具有促进鸡胚背根神经节生长的GDNF成熟蛋白。
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