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目的建立定量检测体外培养软骨细胞外基质中糖胺多糖(GAG)含量的方法,以评价体外培养骺板、关节及肋软骨细胞的生物学功能活性. 方法改进的二甲基亚甲蓝(DMB)比色法测定细胞外基质的糖胺多糖含量,细胞-玻片甲苯胺蓝(TB)染色光镜观察. 结果原代软骨细胞具有最高的GAG分泌活性,骺板(70.12±7.72)μg/cm2,关节(92.00±10.15)μg/cm2,肋软骨(80.61±11.40)μg/cm2,至第三代则出现了非常明显的下降,骺板(53.27±9.50)μg/cm2,关节(63.88±11.92)μg/cm2,肋软骨(58.94±8.21)μg/cm2;TB染色结果与GAG含量变化相一致.三种软骨细胞间比较差异无显著性意义. 结论在体外培养过程中,软骨细胞随传代次数的增加而其功能活性逐渐降低,第三代以后的软骨细胞不适于作为组织工程种子细胞.DMB比色法准确、灵敏,可作为一种用于评价体外培养软骨细胞功能活性的有效分析方法.