全人源鼻咽癌抗独特型抗体I50的原核表达及活性鉴定

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目的:用基因工程手段获得有活性的抗独特型抗体I50,并在体外鉴定其活性。方法:以fuse5-I50为模板,用PCR方法扩增出抗独特型抗体I50基因,并将其插入到pET25b(+)中构建原核表达载体pET25b-I50。含有重组质粒pET25b-I50的菌株E.coli BL21(DE3)经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导能够得到有效表达。采用Western印迹鉴定I50蛋白的表达,采用透析复性方法恢复I50蛋白的活性,并用Dot-ELISA法,淋巴细胞增殖实验鉴定其活性。结果:成功的构建了
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