【摘 要】
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目的 基于紫外分光光度法，建立一种测定白喉毒素无毒突变体CRM197蛋白含量的方法。方法 在天然折叠状态和非折叠状态（CRM197蛋白经盐酸胍变性）下，分别测定相同含量的CRM197蛋白A280 nm值，再根据朗伯-比尔定律c=A/εL计算其折叠状态消光系数。同时，使用当前建立的方法与BCA法分别测定CRM197蛋白的含量，并对2种方法的差异和检测特点进行比较分析。结果 根据CRM197蛋白的氨基
【基金项目】
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四川省科技创新人才项目（2022JDRC0048）；
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目的 基于紫外分光光度法，建立一种测定白喉毒素无毒突变体CRM197蛋白含量的方法。方法 在天然折叠状态和非折叠状态（CRM197蛋白经盐酸胍变性）下，分别测定相同含量的CRM197蛋白A280 nm值，再根据朗伯-比尔定律c=A/εL计算其折叠状态消光系数。同时，使用当前建立的方法与BCA法分别测定CRM197蛋白的含量，并对2种方法的差异和检测特点进行比较分析。结果 根据CRM197蛋白的氨基酸一级序列与相对分子质量计算出其理论消光系数为0.934 mL/（mg·cm）,在280 nm处的实验消光系数为（0.959±0.006）mL/（mg·cm）。2种方法测定同一蛋白样本的结果一致，分别为（2.17±0.02） mg/mL和（2.14±0.09）mg/mL;本方法检测值的CV为0.70%,BCA法检测值的CV为4.15%。结论 本研究建立的CRM197蛋白含量测定方法准确性高、线性范围宽、获取数据快，可用于CRM197蛋白含量的测定，同时为其他载体蛋白的含量测定提供了参考。
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