猪生殖与呼吸综合征病毒ORF6片段的cDNA克隆及鉴定

来源 :城市道桥与防洪 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mgpd141314

【摘要】

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根据已发表的PRRSV基因组序列,设计并合成了1对特异扩增ATCC VR-2332株的ORF6基因的引物.以ATCC VR-2332基因组为模板,通过RT-PCR扩增出586 bp的cDNA产物.将该cDNA片段经T-A

【作者】

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任慧英李文立杨汉春孙月平

【机构】

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莱阳农学院动物科学系,山东,莱阳,265200中国农业大学动物医学院,北京,100094;

【出处】

：

城市道桥与防洪

【发表日期】

：

2004年期

【关键词】

：

猪生殖与呼吸综合征病毒克隆序列分析

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根据已发表的PRRSV基因组序列,设计并合成了1对特异扩增ATCC VR-2332株的ORF6基因的引物.以ATCC VR-2332基因组为模板,通过RT-PCR扩增出586 bp的cDNA产物.将该cDNA片段经T-A连接插入pGEM-Teasy载体中,用重组质粒转化大肠埃希氏菌JM109,获得重组质粒转化菌.对重组质粒DNA进行PCR及酶切鉴定,证明插入的DNA片段与PCR扩增的DNA片段大小相符.对整个ORF6进行序列分析,将测序结果与已发表的ATCCVR-2332序列相比较,证实插入片段为PRRSV VR-2332的ORF6片段的cDNA.

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