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目的:去除重组毕赤酵母表达人Cu,Zn-SOD蛋白溶液中的内毒素,为后续活体动物试验和临床应用提供基础数据。方法:采用TritonX-114萃取与活性炭吸附两种方法单独使用或联合使用的纯化方案,比较不同纯化方案对去除重组蛋白溶液中内毒素以及目标蛋白回收率的效果。结果:通过单因素条件优化,确定重组蛋白溶液最佳操作pH为5.0,活性炭最适添加量为5%以及TritonX-114最适添加量为1%(体积分数)。最后确定活性炭吸附和TritonX-114萃取法联合使用的三步法操作工艺,可高效去除重组蛋白溶液中内毒素。