人源性抗乳腺癌Her-2/neu噬菌体单链抗体库构建

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目的构建乳腺癌患者抗Her-2/neu全人源性噬菌体单链抗体可变区(ScFv)文库,筛选抗Her-2/neu单链抗体。方法收集40例乳腺癌患者前哨淋巴结(SLN),提取总RNA,反转录为cDNA作模板,在目前常用的引物基础上重新设计可变区的引物,用PCR扩增全套抗体可变区,构建T载体库。并改造pCANTAB-5E构建了pCANTAB-Linker。将T载体库酶切连接入pCANTAB-Linker构建出ScFv文库。最后构建噬菌体单链抗体库并进行初级筛选。结果成功改良ScFv文库的构建方法。初步得到12株对
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