小檗碱对永生化结肠细胞系生长的影响及其机制

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目的 观察小檗碱对永生化结肠细胞系(IMCE)生长的影响,探讨其可能机制.方法 IMCE细胞在存在及不存在表皮生长因子(EGF)或TNFα的情况下加入小檗碱,以Ki-67免疫细胞化学染色对有增殖活性的细胞进行标记,采用原位末端转移酶标记技术分析细胞凋亡情况,以Western blot方法检测EGF受体(EGFR)和蛋白激酶B(Akt)及其磷酸化的水平.结果 (1)EGF组的IMCE细胞增殖活性较空白对照组增强,增殖细胞比例为(10.64±1.41)%,EGF+小檗碱组比例为(1.81±0.85)%,显著低于EGF组(P<0.01),小檗碱组比例最低[(0.49±0.42)%].(2)小檗碱组与TNFα组的细胞凋亡比例分别为(8.47±2.52)%和(9.39±2.13)%,明显高于空白对照组[(0.27±0.30)%],P<0.01.(3)EGF组的磷酸化EGFR(p-EGFR)明显增加,EGF+不同浓度小檗碱组的p-EGFR呈浓度依赖性下降.(4)TNFα组的磷酸化Akt(p-Akt)增加,TNF+不同浓度小檗碱组的p-Akt表达较TNFα组下降.结论 小檗碱具有抑制IMCE细胞增殖和促进凋亡的作用,这种作用可能与抑制EGFR和Akt磷酸化有关.
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