【摘 要】
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目的:研究Hsp65与hIL-2的融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力。方法:在大肠杆菌中诱导表达Hsp65与hIL-2的融合蛋白,通过Ni-NTA亲合柱纯化后的蛋白经鉴定后,与佐剂DDA和M
【机 构】
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第四军医大学实验动物研究中心,西安710032第四军医大学基础部微生物学教研室,西安710032
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目的:研究Hsp65与hIL-2的融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力。方法:在大肠杆菌中诱导表达Hsp65与hIL-2的融合蛋白,通过Ni-NTA亲合柱纯化后的蛋白经鉴定后,与佐剂DDA和MPL联合免疫小鼠,连续免疫3次,每次间隔2周,最后一次免疫结束后两周,分离5只小鼠脾淋巴细胞,测定淋巴细胞增殖指数,IFN-y和IL-2水平.以及特异性淋巴细胞杀伤功能,其余5只免疫小鼠用于MTB毒株攻击实验.结果:获得融合蛋白可分别与抗Hsp65和抗hIL-2的单抗发生特异性反应.融合蛋白免疫小鼠后,小鼠脾淋巴细胞被有效活化,诱导产生的7-IFN和IL-2的水平以及CTL杀伤功能均显著高于BCG和单纯Hsp65免疫组(P<0.05).融合蛋白免疫组可有效抵抗MTB毒株攻击,脾脏细菌数显著减少(4.36±0.48),提供的保护力与BCG相当(4.30±0.53).结论:Hsp65与hIL-2的融合蛋白是一种有效的亚单位疫苗,可用于TB的预防.
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