大麦转化体系的改进及TrxS基因的转化

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以啤酒大麦品种"晋引6号"的幼胚为转化起始材料,用基因枪法将分别携带有目的基因(TrxS)和除草剂基因(筛选基因,Bar)的两个质粒进行了共转化,同时对基因转化的相关技术和植株再生的培养方案进行了优化。结果表明,受体材料宜选用预培养15d的幼胚;在培养前2周添加1mg/LABA可抑制胚芽萌发而且有助于胚性愈伤组织的形成;1.0mg/LZT与0.1mg/LIAA激素配比可有效促进愈伤组织的分化。利用优化的培养条件,经在含3~5mg/L筛选剂PPT的培养基上筛选、再生及生根培养。共在178块抗性愈伤组织上获得11株再生植株,再生率达到6.2%,经对T0、T1、T2代PCR、nestedPCR和Southern杂交检测表明,TrxS基因已经稳定整合到大麦基因组中且遗传稳定、结构完整。
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