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摘要：近年，鹌鹑的养殖量逐年上涨，但国内外关于鹌鹑禽流感免疫抗体消长规律的报道较少。因此，该文就不同的疫苗对鹌鹑免疫产生的抗体消长规律展开研究，以期为制定科学的鹌鹑免疫方案提供科学依据。
关键词：鹌鹑;禽流感;抗体;免疫效价
中图分类号：S852.65
文献标识码：B
doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.07.008
0 引言
禽流感是由正粘病毒科流感病毒属A型病毒所引起的一种禽类全身性传染病。世界动物Ii生组织（OIE）将其划为A类动物疫病，被国际卫生武器公约列为传染病[1]。根据禽流感病毒的蛋白质外壳上的血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）蛋白抗原性的不同组合方式可以分为不同的血清型，目前已从禽类鉴定出 16个HA亚型（Hl～ H16），9个NA亚型（Nl～ N9），不同血清型容易发生基因漂变、排列组合或出现新的血清型。其中具有高致病性的是H5和H7 2个亚型，已知这2个血清型属于已发现的人畜共患血清型，以传播迅速、发病快、死亡率高为限制特征。据卫生部门报道，2014年-2016年2月贵州先后报告3起人感染H7N9高致病性禽流感。2016年入冬以来共确诊人感染H7N9流感病例6例，其中死亡4例，遵义市有1例人感染H7N9死亡病例。2004年，国家将其列入为动物强制免疫疫病[2]。免疫依然是该病的主要控制手段，科学的免疫程序据有重要的公共卫生学意义。近年，水禽和家禽主要的免疫的血清型包括H5型、H7型和H9型。随着生活水平的提高，鹌鹑的养殖量逐年上涨，本文针对不同的疫苗对鹌鹑免疫产生的抗体消长规律展开研究。
1 方法与材料
1.1 方法
按照GB/T 18936-2003《高致病性禽流感诊断技术》对鹌鹑的禽流感H5、H7、H9 3种血清型的免疫抗体进行监测。
1.2 材料
随机选择遵义市1家鹌鹑养殖场，对该场的600只40日龄左右的商品鹌鹑进行分组试验。
试验用疫苗为哈尔滨维科生物技术开发公司生产，青岛易邦生物工程有限公司生产的重组禽流感病毒（ H5+H7）二价灭活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）、重组禽流感H5亚型二价灭活疫苗（Re-6毒株+Re-8毒株）和禽流感H5+H9二价灭活疫苗（H5NIRe-6+H9N2Re-2）。
禽流感病毒H5亚型标准抗原（中国哈尔滨维型科生物技术开发公司）;U型96孔血凝板;0.1 mol/L pH为7.2的PBS;1%红细胞悬液。
2 试验与分组
2.1 试验
对200只鹌鹑进行母源抗体监测，剔除据有母源抗体的鹌鹑后进行分组。随机将试验用鹌鹑分为3组。组1皮下注射2 mL H5+H9_价灭活疫苗（H5NIRe-6+ H9N2Re-2）;组2皮下注射2 mL重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）;组3皮下注射2 mL重组禽流感H5亚型二价灭活疫苗（Re-6毒fA+Re-8毒株）。
2.2 采样方案
按照免疫日龄随机抽取每一组鹌鹑20～30只/次，采样方案如表1所示。
3 结果分析
由表2可知，禽流感H9型和H7型在14 d时抗体滴度高于禽流感H5型;禽流感H7型的抗体在14 d时达到峰值，在免疫后21 d开始下降。在28 d时H5型、H7型、Hg型抗体合格率均达到80%以上，保护时长可持续到免疫后42 d。
由表3和图1可知，禽流感H7型产生免疫应答最快，组1和组2在28 d前免疫应答协同，28 d后组1和组2开始下降，组3抗体保护率仍然上升。
由表4可知，禽流感H7型抗體合格率在14 d达到100.00%，但在21 d后下降为95.7%，在28 d时又恢复抗体合格率为100.00%，在28 d后出现下降，42 d时下降为84.60%，、
由表5可知，H9j禽流感疫苗抗体合格率免疫应答曲线在28 d时达到峰值100%，并持续至42 d，未出现下降趋势。
4 讨论与结论
与禽流感H5型抗体保护率对比，重组禽流感H5亚型二价灭活疫苗（Re-6毒株+Re-8毒株）高于重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）和禽流感H5+H9二价灭活疫苗（H5NIRe-6+H9N2Re-2）。青岛易邦生产的禽流感病毒H5（Re-6）株的抗体滴度在19～ 26 d后开始下降，重组禽流感H5亚型二价灭活疫苗（Re-6毒株+Re-8毒株）保护较长[3]。重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）免疫鹌鹑的H5型抗体合格率不理想。
与报道称SPF鸡和矮脚黄鸡均可产生较高水平的禽流感H5、H9型抗体，目能持续至85d以上相比，鹌鹑能产生较高水平的禽流感H5、H9型抗体，保护时长较矮脚黄鸡短。因此，在设计免疫方案时补免间隔要短于肉鸡免疫程序。
禽流感H5+H9二价灭活疫苗（H5NIRe-6+ H9N2Re-2）的H9型免疫应答曲线最为理想，在42日龄后抗体合格率未出现下降趋势。鹌鹑免疫H9型采用该疫苗较为理想。
用重组禽流感病毒（ H5+H7）二价灭活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）免疫鹌鹑的H7型抗体合格率不理想。
单型苗的免疫效果较多型联苗效果好，在制定免疫程序时尽量混合选择。或选择单型苗和多型苗交叉间隔免疫，能产生较好的保护。鹌鹑免疫禽流感疫苗能产生较好的免疫效果。
参考文献
[1]甘孟候禽流感[M].第2版北京：中国农业大学出版社，2002：32-38
[2]陈华，陈静，田夫林，等2009 2013年山东省H5业型禽流感抗体检测[J].山东畜牧兽医，2014，35（9）：3-5.
[3]何飞，付太银，朱明霞某肉鸡场新城疫和禽流感抗体监测与调查分析[J].家禽科学，2015（4）：36-39.
作者简介：颜艾（19 88-），女，中级兽医师，研究方向：动物疫病预防、临床诊断、实验室诊断。
关键词：鹌鹑;禽流感;抗体;免疫效价
中图分类号：S852.65
文献标识码：B
doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.07.008
0 引言
禽流感是由正粘病毒科流感病毒属A型病毒所引起的一种禽类全身性传染病。世界动物Ii生组织（OIE）将其划为A类动物疫病，被国际卫生武器公约列为传染病[1]。根据禽流感病毒的蛋白质外壳上的血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）蛋白抗原性的不同组合方式可以分为不同的血清型，目前已从禽类鉴定出 16个HA亚型（Hl～ H16），9个NA亚型（Nl～ N9），不同血清型容易发生基因漂变、排列组合或出现新的血清型。其中具有高致病性的是H5和H7 2个亚型，已知这2个血清型属于已发现的人畜共患血清型，以传播迅速、发病快、死亡率高为限制特征。据卫生部门报道，2014年-2016年2月贵州先后报告3起人感染H7N9高致病性禽流感。2016年入冬以来共确诊人感染H7N9流感病例6例，其中死亡4例，遵义市有1例人感染H7N9死亡病例。2004年，国家将其列入为动物强制免疫疫病[2]。免疫依然是该病的主要控制手段，科学的免疫程序据有重要的公共卫生学意义。近年，水禽和家禽主要的免疫的血清型包括H5型、H7型和H9型。随着生活水平的提高，鹌鹑的养殖量逐年上涨，本文针对不同的疫苗对鹌鹑免疫产生的抗体消长规律展开研究。
1 方法与材料
1.1 方法
按照GB/T 18936-2003《高致病性禽流感诊断技术》对鹌鹑的禽流感H5、H7、H9 3种血清型的免疫抗体进行监测。
1.2 材料
随机选择遵义市1家鹌鹑养殖场，对该场的600只40日龄左右的商品鹌鹑进行分组试验。
试验用疫苗为哈尔滨维科生物技术开发公司生产，青岛易邦生物工程有限公司生产的重组禽流感病毒（ H5+H7）二价灭活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）、重组禽流感H5亚型二价灭活疫苗（Re-6毒株+Re-8毒株）和禽流感H5+H9二价灭活疫苗（H5NIRe-6+H9N2Re-2）。
禽流感病毒H5亚型标准抗原（中国哈尔滨维型科生物技术开发公司）;U型96孔血凝板;0.1 mol/L pH为7.2的PBS;1%红细胞悬液。
2 试验与分组
2.1 试验
对200只鹌鹑进行母源抗体监测，剔除据有母源抗体的鹌鹑后进行分组。随机将试验用鹌鹑分为3组。组1皮下注射2 mL H5+H9_价灭活疫苗（H5NIRe-6+ H9N2Re-2）;组2皮下注射2 mL重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）;组3皮下注射2 mL重组禽流感H5亚型二价灭活疫苗（Re-6毒fA+Re-8毒株）。
2.2 采样方案
按照免疫日龄随机抽取每一组鹌鹑20～30只/次，采样方案如表1所示。
3 结果分析
由表2可知，禽流感H9型和H7型在14 d时抗体滴度高于禽流感H5型;禽流感H7型的抗体在14 d时达到峰值，在免疫后21 d开始下降。在28 d时H5型、H7型、Hg型抗体合格率均达到80%以上，保护时长可持续到免疫后42 d。
由表3和图1可知，禽流感H7型产生免疫应答最快，组1和组2在28 d前免疫应答协同，28 d后组1和组2开始下降，组3抗体保护率仍然上升。
由表4可知，禽流感H7型抗體合格率在14 d达到100.00%，但在21 d后下降为95.7%，在28 d时又恢复抗体合格率为100.00%，在28 d后出现下降，42 d时下降为84.60%，、
由表5可知，H9j禽流感疫苗抗体合格率免疫应答曲线在28 d时达到峰值100%，并持续至42 d，未出现下降趋势。
4 讨论与结论
与禽流感H5型抗体保护率对比，重组禽流感H5亚型二价灭活疫苗（Re-6毒株+Re-8毒株）高于重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）和禽流感H5+H9二价灭活疫苗（H5NIRe-6+H9N2Re-2）。青岛易邦生产的禽流感病毒H5（Re-6）株的抗体滴度在19～ 26 d后开始下降，重组禽流感H5亚型二价灭活疫苗（Re-6毒株+Re-8毒株）保护较长[3]。重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）免疫鹌鹑的H5型抗体合格率不理想。
与报道称SPF鸡和矮脚黄鸡均可产生较高水平的禽流感H5、H9型抗体，目能持续至85d以上相比，鹌鹑能产生较高水平的禽流感H5、H9型抗体，保护时长较矮脚黄鸡短。因此，在设计免疫方案时补免间隔要短于肉鸡免疫程序。
禽流感H5+H9二价灭活疫苗（H5NIRe-6+ H9N2Re-2）的H9型免疫应答曲线最为理想，在42日龄后抗体合格率未出现下降趋势。鹌鹑免疫H9型采用该疫苗较为理想。
用重组禽流感病毒（ H5+H7）二价灭活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）免疫鹌鹑的H7型抗体合格率不理想。
单型苗的免疫效果较多型联苗效果好，在制定免疫程序时尽量混合选择。或选择单型苗和多型苗交叉间隔免疫，能产生较好的保护。鹌鹑免疫禽流感疫苗能产生较好的免疫效果。
参考文献
[1]甘孟候禽流感[M].第2版北京：中国农业大学出版社，2002：32-38
[2]陈华，陈静，田夫林，等2009 2013年山东省H5业型禽流感抗体检测[J].山东畜牧兽医，2014，35（9）：3-5.
[3]何飞，付太银，朱明霞某肉鸡场新城疫和禽流感抗体监测与调查分析[J].家禽科学，2015（4）：36-39.
作者简介：颜艾（19 88-），女，中级兽医师，研究方向：动物疫病预防、临床诊断、实验室诊断。