【摘 要】
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目的观察在移植人造血干细胞的山羊肝脏组织中是否有人特异蛋白的表达.方法从脐带血中获取人造血干/祖细胞,移植入胎山羊体内,产生嵌合体山羊;取4头出生后10个月的嵌合体山羊
【机 构】
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200040,上海市儿童医院上海医学遗传研究所香港中文大学眼科及视觉科学学系;
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目的观察在移植人造血干细胞的山羊肝脏组织中是否有人特异蛋白的表达.方法从脐带血中获取人造血干/祖细胞,移植入胎山羊体内,产生嵌合体山羊;取4头出生后10个月的嵌合体山羊的肝脏,应用免疫组化技术检测其是否有人增殖细胞核抗原(PCNA)和肝细胞特异性抗原(HSA)的表达,并用FACS检测山羊肝细胞标本中是否存在有人HSA阳性细胞;应用RT-PCR技术分析嵌合体山羊的肝组织是否有人特异的肝细胞核因子(hHNF-3β)和人血清白蛋白(hALB)mRNA表达;应用荧光原位杂交(FISH)技术鉴定嵌合体山羊肝组织的间期细胞核是否存在特异于人17号染色体基因的杂交信号.结果在受体山羊血循环中发现有人血细胞嵌合,证明移植成功.受体山羊肝脏切片中发现有人PCNA和HSA表达,但对照组未见;FACS分析结果显示在嵌合体山羊的肝脏组织中有表达人HSA的阳性细胞;RT-PCR结果表明嵌合体山羊肝细胞表达hHNF-3β和hALB mRNA;FISH结果显示嵌合体山羊肝组织的个别间期细胞核具有两个人特异的杂交信号.结论人造血干细胞移植于胎山羊后可以产生嵌合型肝脏,其在受体羊肝组织中生长和扩增,分化成人的肝细胞,并具备了人肝细胞特异性的转录活性.
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