猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量PCR检测方法的建立

来源 :北京农学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:stupid199001
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【目的】建立一种定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的荧光定量PCR方法。【方法】用RTPCR方法扩增PRRSV的N基因片段,构建含有N基因片段的重组质粒,以不同浓度的PRRSV-N基因重组质粒作为模板来进行检测PRRSV的SYBR Green I荧光定量PCR扩增。【结果】PRRSV SYBR Green I荧光定量PCR的扩增效率为98.2%,标准曲线的决定系数为0.9995,可准确检测的最低核酸模板浓度为60copies/μL,重复性试验的变异系数小于3%,对3种常见的猪源RNA病毒的检测结
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