【摘 要】
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采用分光光度法来检测完整细胞内H2O2酶的活性,以实现细菌的快速检测。由于细菌(本研究以E.coli DH5α为模型)内含有H2O2酶,当往菌液中加入H2O2时,H2O2会在胞内H2O2酶的作用
【机 构】
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浙江大学生物系统工程与食品科学学院
【基金项目】
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教育部新世纪人才项目(No.NCET-07-0725);浙江省重点科技项目(No.2008C14077);国家科技专项(No.2009ZX08012-004B)资助
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采用分光光度法来检测完整细胞内H2O2酶的活性,以实现细菌的快速检测。由于细菌(本研究以E.coli DH5α为模型)内含有H2O2酶,当往菌液中加入H2O2时,H2O2会在胞内H2O2酶的作用下分解,其分解过程遵循一级动力学反应。通过测量该反应中H2O2在240nm处吸光度的变化,可以得出该一级反应的速率常数,从而获悉菌液的浓度。结果表明:大肠杆菌单位细胞浓度酶活为4.2×10-13L/(s·cell),其速率常数与浓度在5.7×106～5.7×107cfu/mL范围内呈现良好的线性关系,检出限为5.7×106cfu/mL。本方法是一种检测细菌总数的快速方法,测试时间为5～10min。
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