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目的 研究动物活体肝枯否细胞靶向性基因敲减 β-1,3-D葡聚糖包裹Endoporter-siRNA颗粒(β-1,3-D-glucan-encapsulated Endoporter-siRNA particles,GeRPs)注射方法对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)/D-氨基半乳糖(D-galacto-samine,D-GalN)诱导急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)小鼠肝组织内羧酸酯酶1f(carboxylesterase 1f,Ces1f)表达的影响.方法 采用β-1,3-D-葡聚糖包裹Endoporter-Ces1f-siRNA复合物的方法制备GeRPs.健康雄性C57BL/6小鼠随机分为5组:A为正常对照组[GeRPs(-)LPS/D-GalN(-)Endoporter(-)],B为模型组[GeRPs(-)LPS/D-GalN(+)Endoporter(-)],C为预处理组[GeRPs(+)LPS/D-GalN(-)Endoporter(-)],D为预处理模型组[GeRPs(+)LPS/D-GalN(+)Endoporter(-)],E为空白组[GeRPs(-)LPS/D-GalN(-)Endoporter(+)].以上各组分别采用GeRPs或Endoporter或PBS预处理后,再以LPS/D-GalN腹腔内注射诱导ALF实验动物模型.采用原位胶原酶灌注和选择性贴壁等方法分离培养小鼠原代肝细胞,并以LPS刺激细胞.Ces1f基因表达采用real-time PCR方法和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)方法检测;肝脏组织病理形态学变化采用光学显微镜观察.结果 PCR与FISH结果显示,与A组比较,B组、C组和D组Ces1f基因的表达均显著下调(均为P<0.01);D组Ces1f mRNA的相对表达水平较B组下降(P<0.05).在原代肝细胞中,LPS刺激较非刺激细胞Ces1f的表达也明显下调(P<0.01);经LPS/D-GalN刺激后,小鼠肝脏组织病理损伤明显,通过GeRPs预处理可进一步加重LPS/D-GalN诱导的急性肝衰竭小鼠肝脏病理损伤效应.结论 GeRPs方法能够下调健康小鼠肝组织Ces1f基因表达,同时,GeRPs预处理能进一步下调ALF小鼠肝组织中Ces1f mRNA表达的受抑程度,并加重ALF小鼠肝脏病理损伤效应.