【摘 要】
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目的构建含衣原体蛋白酶样活性因子（CPAF）的原核表达载体,经转化E.coli以表达CPAF融合蛋白,研究其生物学功能。方法从病料中克隆得到CPAF的原始基因,将PCR产物经纯化连接到pMD1
【机 构】
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吉林大学中日联谊医院,中国人民解放军第208医院,军事医学科学院军事兽医研究所基因工程重点实验室
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目的构建含衣原体蛋白酶样活性因子（CPAF）的原核表达载体,经转化E.coli以表达CPAF融合蛋白,研究其生物学功能。方法从病料中克隆得到CPAF的原始基因,将PCR产物经纯化连接到pMD18-T,将重组质粒pMD-CPAF经NdeI和BamHI双酶切,与用相同酶消化的原核表达载体pET42b（＋）连接,建立pET42b（＋）-CPAF表达载体,阳性克隆经鉴定后,转化大肠杆菌BL21（DE3）进行表达,经亲和纯化、离子交换纯化、分子筛纯化融合蛋白,进行SDS-PAGE分析,Western印迹检测。结果经
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