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目的 建立竞争性定量PCR检测幽门螺杆菌cagA基因的方法。方法 以重组PCR将乳糖操纵子中Lac阻抑蛋白特异性结合序列(21bp)重组入cagA基因397bp的片段中构建内参标模板(rfcagA)。体外克隆并表达具有双功能的GST-LacⅠ融合蛋白，其一端只有GST酶活性，另一端可特异性地与重组内参标模板结合。在定量PCR中．以rfcagA为内参标模板．pMC3或Hp基因组cagA作为竞争性模板，PCR产物的5′—端标记了生物素．可与包被了亲和素的微孔板结合，只有rfcagA的PCR产物可与融合蛋白结合