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目的 构建霍乱孤菌ctxB基因真核表达重组质粒,并在NIH3T3细胞中进行表达。方法 用限制性核酸内切酶从重组质粒pET32a-ctxB上切下ctxB基因,导入真核表达载体pcDNA3.1(+),重组子经限制性酶切分析、PCR鉴定正确后,命名为pcDNA3.1-ctxB。用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-ctxB转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法对pcDNA3.1-ctxB的瞬时表达产物进行鉴定。结果 约380bp的ctxB被克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体中,经测序无误后,用阳离子脂质体转