【摘 要】
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目的 建立基于单核苷酸多态性( SNP)分型的系列特异嵌合体定量方法.方法 用免疫磁珠分选技术分离CD3+T淋巴细胞和CD15+粒细胞,利用TaqMan探针建立实时荧光定量聚合酶链反应(
【机 构】
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山西省肿瘤医院血液科,山西医科大学法医学院,山西省儿童医院中心实验室
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目的 建立基于单核苷酸多态性( SNP)分型的系列特异嵌合体定量方法.方法 用免疫磁珠分选技术分离CD3+T淋巴细胞和CD15+粒细胞,利用TaqMan探针建立实时荧光定量聚合酶链反应( PCR)法,对模拟血细胞嵌合体进行检测,并作出标准曲线,以评价该法的灵敏性和特异性.结果 免疫磁珠分选技术分选血细胞纯度可达94％～ 97％.所选的SNP位点在供受者间至少有两个可区分彼此的信息位点.扩增产物中供受者嵌合百分比的对数同实时荧光定量PCR检测的Ct值显著直线相关,线性相关系数r＞0.98,灵敏度不低于0.1％,特异性亦较好.采用实时荧光定量SNP-PCR定量分析同期4例临床病例,根据模拟嵌合体标准曲线对其中1例计算,得到的嵌合率为87.50％.结论 基于SNP分型的TaqMan探针实时荧光定量PCR法灵敏度高,特异性好,可用于造血干细胞移植术后血细胞嵌合体的检测.
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