小麦随机扩增多态性DNA的反应体系探索

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随机扩增多态性DNA(RAPD)是近年来发展起来的一种DNA多态性检测技术.通过以小麦基因组DNA为模板,对RAPD反应程序中的一些重要参数进行摸索和优化试验,建立了随机扩增多态性DNA分析应用反应体系.即反应体积为25μ1,Mg2+浓度为2.0 mM,dNTP浓度为150μM,模板DNA量5ng~25ng,随机引物量30ng~45 ng,Tap酶1单位;反应过程为90℃变性30s,38℃结合1min,72℃延伸2min(最后一个循环10min),共40个循环.该体系可有效地应用在小麦遗传育种研究中,重复性好,可靠性高.
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