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目的：建立不含佛波醇酯（TPA）和霍乱毒素（CT）培养液培养人类正常表皮黑素细胞的方法，避免TPA的致瘤危险和霍乱毒素的毒性。方法：临床环切包皮经中性酶-胰酶（Dispase Ⅱ—Trypsin）两步消化后，获得表皮基底细胞悬液，于不含TPA和CT的KC—SFM角质形成细胞无血清培养基培养，用差速贴壁法及胰酶差速消化法去除角质形成细胞，用两段法去除成纤维细胞污染，观察黑素细胞的增殖情况和树突伸展状态，采用多巴（Dopa）染色和免疫组化对黑素细胞进行鉴定。结果：经过7天的培养，黑素细胞达到70％汇合，细胞呈