【摘 要】
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目的：构建针对人半翼基因（hWAPL）的短发夹RNA（shRNA）真核表达载体,并观察其转染效率.方法：根据hWAPL基因序列,设计并合成特异性的小干扰片段,将其定向克隆到带有卡那抗性和增强绿色
【基金项目】
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浙江省实验动物科研计划项目（2008F80025）,嘉兴市科技局科研项目（2008AY2039-3）
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目的：构建针对人半翼基因（hWAPL）的短发夹RNA（shRNA）真核表达载体,并观察其转染效率.方法：根据hWAPL基因序列,设计并合成特异性的小干扰片段,将其定向克隆到带有卡那抗性和增强绿色荧光蛋白的真核表达载体pGenesil-1中,酶切和测序后,用脂质体转染到CasKi细胞中,观察荧光表达,鉴定转染效率.RT-PCR检测结果表明,筛选到的短链hWAPL siRNA能有效抑制内源hWAPL的表达.结果：成功构建了表达shRNA的质粒及其阴性对照质粒,转染到CasKi细胞系中可以特异下调hWAPL m
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