【摘 要】
：
目的构建RT-PCR一步法实时荧光定量PCR检测WT1基因mRNA表达的方法,准确定量检测白血病患者微小残留病,指导临床判断预后和早期预测复发。方法从K562细胞提取的RNA用特异性引
论文部分内容阅读
目的构建RT-PCR一步法实时荧光定量PCR检测WT1基因mRNA表达的方法,准确定量检测白血病患者微小残留病,指导临床判断预后和早期预测复发。方法从K562细胞提取的RNA用特异性引物扩增WT1基因,pMD18-T载体克隆法构建荧光定量PCR标准模板,建立RT-PCR一步法实时荧光定量PCR检测WT1基因方法,并对该方法的灵敏度、重复性和稳定性进行检测。结果构建的RT-PCR一步法实时荧光定量PCR方法的灵敏度达10-4水平;以拷贝数为1.0×106~1.0×102cps/ml的标准品,分别进行RT-PCR一步法实时荧光定量PCR扩增后,标准品的Ct值与该标准品模板起始浓度的对数存在线性关系,r值达0.998;管间和批间的变异系数均小于8%。结论所建立RT-PCR一步法实时荧光定量PCR检测WT1基因方法的灵敏度、重复性和特异性好;RT和PCR反应过程一步完成,更简便快捷,减少加样和污染机会,更适合临床检测。
其他文献
目的通过分析比较不同参数不同来源精子行卵细胞浆内单精子注射(ICSI)治疗后其胚胎质量、临床结局和出生缺陷之间的差异性,以探讨ICSI治疗的安全性。方法对980个ICSI周期按精
浅层反射地震方法是城市活断层探测常用的技术,但在基岩埋深比较浅的地区,往往只能识别出基岩顶面的反射波,而仅根据反射地震剖面上单个同相轴的变化很难准确判定断层是否存
新时期党的民族区域自治理论的发展和创新是建立在马克思主义民族理论和毛泽东民族区域自治思想基础上的,经过党的三代领导集体的不懈的探索,民族区域自治理论被赋予了许多新
科举考试以汉字为主要载体,深受汉字文化影响。科举考试的汉字文化特征主要表现在考试科目、取士标准、考试文体和考试影响四方面。科举制度具有平民精神,它对于中国古代汉字
高校残疾大学生的人数随着扩招和残疾人权益保护的加强而逐年增长,但残疾大学生的心理问题日益突出,严重地影响了残疾大学生的健康成长。分析残疾大学生的常见心理问题及其成
随着高速精密数控冲床向高速、精密方向的发展,冲床的热态特性以及由此带来的热变形问题成为迫切解决的课题之一。论文以国家科技重大专项“高档数控机床与基础制造装备”项
<正>为什么仅仅这样一件小事,引发了一场命案。大学生如何与室友交往,如何避免此类事件的发生,每个人都应该有所思考。祸起水费据《南方周末》记者了解,复旦学生黄洋和另一室
服饰是人类生活的重要组成部分。随着社会的发展,服饰的感染力、服饰文化的标志性、象征性及功能性越来越备受关注。人们在探讨各种服饰会带人不同感觉的同时,也开始逐渐探寻