【摘 要】
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目的探讨乏氧对甘氨酸-N-甲基转移酶(Glycine-N-methyltransferase,GNMT)表达的影响,以及GNMT与缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1alpha,HIF1α)表达之间的关系。
【机 构】
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上海交通大学医学院附属仁济医院核医学科,
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目的探讨乏氧对甘氨酸-N-甲基转移酶(Glycine-N-methyltransferase,GNMT)表达的影响,以及GNMT与缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1alpha,HIF1α)表达之间的关系。方法 HepG2,293T,H460 3株细胞常规培养并设立常氧组和乏氧组,待细胞生长至50%~60%融合后,将乏氧组细胞放入1%氧气乏氧箱继续培养24h,常氧组继续常规培养24h后,运用半定量PCR,实时荧光定量PCR方法分析HepG2,293T,H460 3株细胞乏氧后相对于常氧GNMT基因的表达变化;通过小RNA干扰方法敲低HepG2细胞中HIF1α基因和HIF2A基因,运用实时荧光定量技术检测干扰效率,并检测GNMT基因的表达变化。结果乏氧能够下调HepG2,293T,H460 3株细胞中GNMT基因的表达,HepG2细胞中抑制最明显;3株细胞的GNMT基因表达抑制率分别为68%,17%,21%;在HepG2细胞中敲低HIF1α基因能够引起GNMT表达明显上调,而敲低HIF2A后GNMT表达无明显变化。结论在HepG2细胞中乏氧可能通过HIF1α下调GNMT的表达。
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