【摘 要】
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目的 基于蛋白激酶B（AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路探讨黄芪汤含药血清对血管内皮生长因子（VEGF）诱导的大鼠肝窦内皮细胞（LSEC）增殖、迁移和成管能力的影响。方法 制备黄芪汤含药血清，体外分离、培养SD大鼠LSEC,将大鼠LSEC随机分为空白组，VEGF组，血清对照组，低、中、高剂量黄芪汤含药血清组，利用噻唑蓝（MTT）比色法、Transwell实验、成管实验分别检测各组
【机 构】
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上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金（81774098）； 上海市浦东新区名中医工作室建设项目（PWRzm2020-14）～～；
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目的 基于蛋白激酶B（AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路探讨黄芪汤含药血清对血管内皮生长因子（VEGF）诱导的大鼠肝窦内皮细胞（LSEC）增殖、迁移和成管能力的影响。方法 制备黄芪汤含药血清，体外分离、培养SD大鼠LSEC,将大鼠LSEC随机分为空白组，VEGF组，血清对照组，低、中、高剂量黄芪汤含药血清组，利用噻唑蓝（MTT）比色法、Transwell实验、成管实验分别检测各组LSEC增殖、迁移和成管能力，通过Western Blot法检测血小板-内皮细胞黏附分子-1（CD31）、内皮素-1（ET-1）、内皮性一氧化氮合酶（eNOS）和AKT/mTOR信号通路中AKT、磷酸化（p）-AKT、mTOR、磷酸化（p）-mTOR蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用Tukey’s检验。结果 与空白组相比，VEGF组、血清对照组能够促进大鼠LSEC增殖、迁移和血管新生（P值均＜0.05）;Western Blot结果显示，CD31、ET-1、eNOS和AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达显著升高（P值均＜0.05）。VEGF组与血清对照组比较，上述指标差异均无统计学意义（P值均＞0.05）。与血清组比较，黄芪汤中、高剂量组能显著抑制VEGF诱导的大鼠LSEC增殖、迁移和血管新生（P值均＜0.05）;Western Blot结果显示，CD31、ET-1、eNOS和AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达均显著降低（P值均＜0.05）。结论 较高剂量黄芪汤含药血清能抑制VEGF诱导的大鼠LSEC增殖、迁移和成管能力，其作用机制可能与调控AKT/mTOR信号通路有关。
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