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引物是决定PCR结果的关键。本实验中引物1、2虽有26个碱基,但由于其5端有6个碱基为限制性内切酶的部分识别序列,所以实际上只有20个碱基与原始模板互补配对。采用标准的PCR方法不能产生理想的结果。经采用PCR-两段法从喉癌组织中扩增到477bp的DNA片段-nm23-HI基因,对于应用PCR技术扩增人类基因组基因做了有益的尝试,扩增的nm23-H1基因为进一步做变异分析打下基础。