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目的
探讨血红素氧和酶-1(HO-1)在姜黄素对原代心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤后处理中的表达及意义。
方法实验分为5组:正常对照组、姜黄素组(10 μmol/L)、H/R组、姜黄素(10 μmol/L)+ H/R组、姜黄素+ZnPP-Ⅸ(HO-1抑制剂)+H/R组。检测细胞活性及培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性,评估细胞损伤情况;检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3凋亡酶活性;JC-1探针检测细胞膜电位;通过Western blot检测各组细胞HO-1、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)表达。
结果与H/R组比较,姜黄素可以诱导HO-1和bcl-2的表达,抑制bax的表达,加入ZnPP-Ⅸ后,HO-1和bcl-2表达减弱,bax表达上调(P=0.001、0.006、0.007)。与对照组比较,H/R组线粒体膜电位显著降低(31±7)%比100%(P=0.004),姜黄素后处理可以提高线粒体膜电位(75±16)%比(31±7)%(P=0.011),而加入ZnPP-Ⅸ阻断了姜黄素对心肌细胞的保护作用(19±4)%比(75±16)%(P=0.001)。姜黄素同时具有增加心肌细胞活性和SOD活性,降低LDH、MDA浓度,及降低Caspase-3活性,降低细胞损伤、氧化应激损伤和凋亡。
结论姜黄素可通过诱导HO-1表达,减轻氧化应激及抗凋亡而具有心肌细胞保护作用,而HO-1抑制剂ZnPP-Ⅸ可以阻断姜黄素的心肌保护作用。