【摘 要】
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目的：原核表达柯萨奇病毒A组16型（CVA16）衣壳蛋白VP1,以便于研制血清学检测试剂。方法：在基因库中钓取CVA16-VP1的全长序列,采用PCR逐步合成法合成其全长基因,测序正确后克隆到表
【机 构】
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首都医科大学附属北京佑安医院,北京市肝病研究所,军事医学科学院基础医学研究所
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目的：原核表达柯萨奇病毒A组16型（CVA16）衣壳蛋白VP1,以便于研制血清学检测试剂。方法：在基因库中钓取CVA16-VP1的全长序列,采用PCR逐步合成法合成其全长基因,测序正确后克隆到表达载体pET28a（＋）中,构建重组表达质粒pET28a（＋）/VP1,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,利用Ni2＋亲和层析柱对重组蛋白进行纯化;建立捕获免疫酶联法检测IgM抗体,检测20份手足口病阳性血清和30份阴性血清,评价重组抗原的灵敏度和特异性;采用CVA16全病毒免疫的抗小鼠血清进行Western
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