【摘 要】
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目的建立大鼠肺动脉内皮细胞(PAEC)、肺静脉内皮细胞(PVEC)以及肺微血管内皮细胞(PMVEC)的体外分离和培养方法，分析3种肺血管内皮细胞的生物学特征及功能。方法本研究为实验研究。精分1只雄性SD大鼠肺动脉、肺静脉，肺组织取边缘剪碎，各样本分别用混合酶液消化，以血小板-内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)免疫磁珠法分选内皮细胞，用内皮细胞专用培养基培养。倒置显微镜下观察3种肺血管内皮细胞的形态差别，通过免疫荧光鉴定各组细胞纯度。通过免疫荧光和Westernblot观察3组细胞血管性血友病因子
【机 构】
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广州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科 广州呼吸健康研究院 国家呼吸系统疾病临床医学研究中心 国家呼吸医学中心 呼吸疾病国家重点实验室，广州 510120广州再生医学与健康广东省实验室，广州 51
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目的建立大鼠肺动脉内皮细胞(PAEC)、肺静脉内皮细胞(PVEC)以及肺微血管内皮细胞(PMVEC)的体外分离和培养方法，分析3种肺血管内皮细胞的生物学特征及功能。
方法本研究为实验研究。精分1只雄性SD大鼠肺动脉、肺静脉，肺组织取边缘剪碎，各样本分别用混合酶液消化，以血小板-内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)免疫磁珠法分选内皮细胞，用内皮细胞专用培养基培养。倒置显微镜下观察3种肺血管内皮细胞的形态差别，通过免疫荧光鉴定各组细胞纯度。通过免疫荧光和Western blot观察3组细胞血管性血友病因子(vWF)和平滑肌激动蛋白抗体(α-SMA)蛋白表达情况。通过基质胶体外成环实验比较3组细胞1.5、2.5、3.5、4.5、5.5、6.5、7.5 h成环情况。采用SPSS 22.0和FlowJo 10软件进行统计学分析和统计作图。
结果3组细胞24 h后均迅速贴壁，vWF免疫荧光染色均为阳性。3组细胞形态均为铺路石状，其中PAEC为典型的铺路石状，大多数呈椭圆形；而PVEC、PMVEC形态更细长。免疫荧光显示PVEC和PMVEC细胞浆内少量α-SMA蛋白弥散表达[(0.16±0.03)、(0.23±0.01)]，而PAEC中几乎观察不到α-SMA蛋白表达(0.06±0.01)。随着时间推移，3种肺血管内皮细胞成环周长均呈先上升后下降趋势，其中PVEC组成环长度最长。3组细胞成环周长在组间、时点间、时间和组间交互作用差异均具有统计学意义(P值均
其他文献
慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)的治疗技术进展迅速。随着手术、介入、靶向药物的开发以及综合治疗策略的观念更新，CTEPH患者的预后已有显著改善。但CTEPH的诊断和治疗仍面临很大挑战，如何正确应用影像学检查方法早期识别和诊断CTEPH？如何根据不同患者的表型选择个体化治疗方案？如何以研究推动CTEPH患者的规范化管理与CTEPH诊治中心建设？本文拟结合这些问题阐述对CTEPH诊治与研究的思考。
肺动脉高压病因多样、发病机制复杂。近年来肺动脉高压领域取得了诸多进展，诊断策略不断更新。为更好指导我国从事呼吸专业医师的临床实践，本文根据《中国肺动脉高压诊断与治疗指南(2021版)》的内容，就诊断流程进行了详细的解读，以利于读者更好地对肺动脉高压患者进行规范化的诊断，从而使患者在后期治疗中尽早获益。
慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)是一种急性肺血栓栓塞症的远期并发症。2021年1月，《中国肺动脉高压诊断与治疗指南(2021版)》发布，将CTEPH作为单独章节，从CTEPH早期识别、诊断及治疗三个方面出发，明确了如何利用影像学检查早期识别CTEPH，提出了肺动脉血栓内膜剥脱术、靶向药物治疗、球囊肺动脉成形术的适应证及临床获益，强调了建立专业CTEPH诊疗中心的重要性。本文旨在结合临床实践，对指南CTEPH章节内容进行分析解读，更好地指导CTEPH的规范诊治。
肺动脉高压病因多样、病情复杂。肺动脉高压临床上主要分为5大类，其中第1大类为动脉性肺动脉高压(PAH)。对于PAH患者需综合多项指标对病情严重程度进行评估，包括临床特征、运动耐量、生物标志物、影像学及血流动力学指标等。《中国肺动脉诊断与治疗指南(2021版)》提出了以危险分层为导向的治疗策略。本文将结合该指南对PAH的功能评价、PAH综合评估及危险分层等进行解读。
肺部疾病和/或低氧所致肺动脉高压(PH)属于PH中的第三大类。当慢性肺部疾病(CLD)及低氧性疾病合并PH时，患者肺功能及生活质量明显下降，疾病经济负担及病死率增加。建议从两方面早期筛查，一方面在PH患者中筛查CLD；另一方面在CLD及低氧血症患者中筛查PH。对于高度疑诊及确诊患者需早期干预，除对于原发疾病针对性治疗外，推荐长期家庭氧疗；虽然有研究显示使用靶向药物部分获益，但不常规推荐。
动脉性肺动脉高压(PAH)以进行性肺动脉压力和肺血管阻力升高为特点，如不及时治疗，病死率较高。目前临床批准用于治疗PAH的靶向治疗药物已广泛应用于临床，而正确应用这些药物是保证治疗效果的基础。PAH患者在治疗过程中，应尽快达到并维持低危状态。在用药过程中，应遵循初始联合治疗、足量给药的原则，并根据危险分层的变化，及时调整用药方案。因此，严格密切的随访对PAH患者至关重要，本文将从PAH患者的治疗目标、药物治疗应遵循的原则以及如何根据随访结果调整治疗方案等方面，详述PAH的治疗原则。
咯血作为肺动脉高压少见的临床表现，与其并发症和肺血流的异常分布有关，常提示病情重、预后差。《中国肺动脉高压诊断与治疗指南(2021版)》中关于肺动脉高压合并咯血的治疗推荐仅在心肺移植标准中指出，明显咯血为心肺移植标准之一。由于肺动脉高压合并咯血临床处理复杂、文献的质量和数量有限，指南并未对其他治疗方式作统一推荐或说明。本文结合文献就肺动脉高压合并咯血的病因识别和治疗进行解读。
动脉性肺动脉高压(PAH)主要累及肺动脉和右心，表现为右心室肥厚、右心房扩张、肺动脉主干扩张等，最终可导致右心衰竭和死亡。PAH的发病机制复杂，其中免疫机制发挥重要作用。树突状细胞(DC)处于免疫反应的核心地位，主要分为四类：常规DC(包括1型常规DC和2型常规DC)、单核细胞衍生的DC、浆细胞样DC和朗格汉斯细胞，在PAH研究中以常规DC、单核细胞衍生的DC和浆细胞样DC为主。本文就DC的来源、分布、分类、功能以及其在PAH发生、发展中的作用进行综述，以期更好地了解PAH的发病机制。
动脉性肺动脉高压(PAH)是一种以肺动脉压升高为特征且预后极差的疾病。目前具有适应证的药物可改善肺动脉高压患者预后，但无法治愈，探讨其发病机制、寻找新的治疗靶点是当前PAH研究热点。维生素D是一种类固醇激素，在体内活性形式为1，25-二羟维生素D3。近年来维生素D缺乏已被证明与多种自身免疫病的发病有关。维生素D缺乏可影响PAH的发生，本综述探讨维生素D缺乏在PAH发生、发展中的作用，并讨论维生素D补充对PAH的治疗意义，旨在为药物治疗肺动脉高压提供新思路。
目的探究骨形成蛋白4(BMP4)在血小板源性生长因子(PDGF)诱导的肺动脉重塑中的作用及其机制。方法本研究为实验研究。使用细胞活力检测、蛋白活力测定、蛋白质印迹法、siRNA干扰技术等方法研究BMP4对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的作用。烟雾连续暴露12周小鼠构建肺动脉重塑的动物模型，免疫荧光检测肺动脉BMP4的表达。结果相较于PDGF组，PDGF BMP4组能够抑制Ⅰ型胶原蛋白的合成(P